Àú´Â ¹Ì±¹¿¡¼ ÇкΠ»ýÈÇÐÀü°øÇÏ°í ´ëÇпøÀº ¾àÇÐÀü°øÇÑ ÇöÁ÷ ¹Ì±¹¾à»ç°í¿ä (ÀÎÁõÀº Àü¿¡ ¹Ì±¹¾à»ç ÀÎÁõÇÏ°í Áú¹®¹Þ´Â±Û¾´ÀûÀÖ°í¿ä)
Á¶±¹±³¼öµþÀ̾´ ³í¹®¾ê±â°¡ Çϵµ ÇÖÇϱ淡 ÀоîºÃ´Âµ¥
¾àÇаú´Â °Å¸®°¡Á»ÀÖ´ÂÁÖÁ¦ÀϼøÀÖÁö¸¸.. Á¦°¡ ´ëÇÐÁ¹¾÷ÇÏ°í ´ëÇпø°¡±âÀü 1³â gap yearµ¿¾È Research AssociateÀ¸·Î ÀÏÇϸç Ç㱸Ç峯 ÇÑ°ÍÁßÇϳª°¡ PCRÀÌ´Ùº¸´Ï..½áº¸¸é...
¿ì¼± ³í¹®À» ¿ä¾àÇغ¸¸é
1. HIE¶ó´Â Áúº´À» ¾Î´Â 91¸í ȯÀڵ鿡°Ô¼ Ç÷¾×äÃë
2. Ç÷¾×¿¡¼ DNA ºÐ¸®
3. DNA¸¦ PCRÀ» ÅëÇØ º¹Á¦¹× ÁõÆø
4. 3¿¡¼¾ò¾îÁø DNA¸¦ Restriction EnzymeÀ¸·Î ƯÁ¤À§Ä¡¸¦ ÀÚ¸§
5. 4¿¡¼¾ò¾îÁø DNA¸¦ Àü±â¿µµ¿À¸·Î ºÐ¼®
6. SPSS·Î 91¸í ȯÀÚµéÀº 298¹ø ¾Æ¹Ì³ë»êÀÇ Á¾·ù¿¡µû¶ó ºÐ·ù
´ëÃæ ÀÌÁ¤µµÀÔ´Ï´Ù.
1¹ø°ú 2¹øÀº ºñÀü°øÀÚ¿©µµ ¹«½¼¸»ÀÎÁö ÀÌÇظøÇÒ¸®´Â¾ø´ÂºÎºÐÀ̴ϱî... ¼³¸íÆнºÇÏ°í
3¹øºÎÅͼ³¸íÀ»Çغ¸ÀÚ¸é (ÃÖ´ëÇÑ ½±°Ô ÀÌÇØÇÒ¼öÀÕµµ·Ï ³ë·ÂÇغ¸°Ú½À´Ï´Ù...)
PCRÀº DNA¸¦ º¹Á¦ÇÏ´Â ¹æ¹ýÁßÇϳªÀε¥
DNA°¡ ÀÌÁß³ª¼±±¸Á¶À롂 ´Ùµé À߾ƽǰ̴ϴÙ
ÀÌ·± DNAÀ» double stranded DNA ÁÙ¿©¼ dsDNA¶ó°íÇϴµ¥¿ä
A-T G-CÀÇ ¼ö¼Ò°áÇÕÀ¸·Î ÇѽÖÀÌ ¼·ÎºÙ¾îÀִ°Ŷó
ÀÌ DNA¸¦ ÀÏÁ¤¿Âµµ±îÁö (º¸Åë 90-95µµ) °¡¿ÇÏ¸é ¼ö¼Ò°áÇÕÀ̱úÁ®¼
ÇѽÖÀ» ÀÌ·ç´Â °¢°¢ÀÇ strand°¡ ¶³¾îÁö°ÔµË´Ï´Ù.
ÀÌ DNAÀ» single stranded DNA ÁÙ¿©¼ ssDNA¶ó°íÇϴµ¥¿ä
°¡¿ÇÑ DNA¸¦ ´Ù½Ã½ÄÈ÷¸é µÎ°³ÀÇ ssDNA´Â ´Ù½Ã ºÙ¾î¼ Çϳª·Î ÇÕÃÄÁ®¼ ÇÑ°³ÀÇ dsDNA°¡µË´Ï´Ù.
ÀÌ ¼ºÁú°ú ÀÎü³»¿¡¼ DNAº¹Á¦°¡ÀϾ´Â ¿ø¸®¸¦ ÀÀ¿ëÇÏ´Â°Ô PCRÀä
PCRÀÇ ¹æ¹ýÀº ¸Å¿ì°£´ÜÇÕ´Ï´Ù
DNA »ùÇÃ, Primer, dNTP, DNA Polymerase, ±×¸®°í ¹öÆÛ
´Ù¼¸°¡Áö¸¦ ¼¯¾î¼ Å×½ºÆ®Æ©ºê¿¡³Ö°í
°¡¿Çß´Ù°¡ ½ÄÇû´Ù°¡ °¡¿Çß´Ù°¡ ½ÄÇû´Ù°¡¸¦ ¹Ýº¹ÇÏ¸é »ùÇà DNA°¡ º¹Á¦µÇ´Â °á°ú¸¦ º¼¼öÀÖ½À´Ï´Ù.
ÀÌ ¿ø¸®¸¦ ¼³¸íÇÏÀÚ¸é
À§¿¡¼ dsDNA¸¦ °¡¿Çؼ ssDNA·Î¸¸µå´Â°Í±îÁø °°Àºµ¥¿ä
PCRÀ» ÁøÇàÇϸé DNA¿Í ÇÔ²² primer°¡ µé¾îÀֱ⶧¹®¿¡
dsDNA¸¦ °¡¿Çؼ ssDNA·Î¸¸µçµÚ ´Ù½Ã½ÄÈ÷¸é
ssDNAµÎ°³°¡ ¼·Î µé·¯ºÙ¾î¼ dsDNA·Î ´Ù½ÃµÇµ¹¾Æ¿À´Â°Ô¾Æ´Ï¶ó
ssDNA¿¡ primer°¡ µé·¯ºÙ¾î¼ À§¿Í°°ÀºÇüÅ°¡µË´Ï´Ù
Âü°í·Î primer°¡ ¹«¾ùÀÎÁö¼³¸íÇغ¸¸é
½±°Ô¼³¸íÀ»Çغ¸ÀÚ¸é DNA¿¡ ´ëÀÀÇÏ´Â 15~20°³ nucleotide°¡ ºÙ¾îÀÖ´Â ÀÏÁ¾ÀÇ ¹Ì¿Ï¼º DNAÁ¶°¢À̶ó°í »ý°¢ÇϽøéµË´Ï´Ù.
Primer°¡ ssDNA¿¡ µé·¯ºÙÀºµÚ¿¡´Â ¾î¶»°ÔµÇ´Â°¡?
±×µÚ¿¡´Â DNA Polymerase¶ó´Â È¿¼Ò°¡ ¿Í¼ ¹Ì¿Ï¼ºÀÎ primerÀÇ µÞºÎºÐ¿¡ dNTP¸¦ ºÎÂøÇÏ¿©¼
DNA¸¦ ¾Æ¿¹ ÇÑ°³¸¦ ¸¸µé¾î¹ö¸®°í°©´Ï´Ù.
±×¸®°í ÀÌ°úÁ¤À» ¿©·¯¹ø ¹Ýº¹À»Çϸé (Çѹø¹Ýº¹ÇѰŸ¦ 1 cycleÀ̶óÇÕ´Ï´Ù)
n cycle¹Ýº¹ÇÞÀ»¶§ 2^n¹è¸¸ÅÀÇ º¹Á¦µÈ DNA¸¦ ¾òÀ»¼ö°¡ÀÖÁÒ.
¿ø¸®´Â Á¶±Ýº¹ÀâÇغ¸ÀϼöµµÀÖÁö¸¸...
PCR¿ë Å×½ºÆ®Æ©ºê¸¦ ±¸ÇÑ´Ù -> DNA¸¦ Å×½ºÆ®Æ©ºê¿¡³Ö´Â´Ù -> primer¸¦ Å×½ºÆ®Æ©ºê¿¡ ³Ö´Â´Ù -> PCR±â°è¿¡³Ö´Â´Ù
±â°è°¡ ¾Ë¾Æ¼ °¡¿->½ÄÈû->°¡¿->½ÄÈûÀ» ¹Ýº¹ÇØÁØ´Ù -> DNA°¡ º¹Á¦µÇ¾îÀÖ´Ù
¶ó´Â ¸Å¿ì °£´ÜÇÑ °úÁ¤À»ÅëÇؼ DNA¸¦ º¹Á¦ÇϰԵ˴ϴÙ.
±×·³ 3¹øÀº¿©±â±îÁöÇÏ°í
4¹ø restriction enzymeÀ¸·Î DNAó¸® ¶ó´Â°É¼³¸íÀ»Çغ¸ÀÚ¸é
restriction enzymeÀº ƯÁ¤À§Ä¡¿¡¼ DNA¸¦ À߶óÁÖ´Â È¿¼ÒÀÔ´Ï´Ù
¿¹¸¦µé¾î¼ DNA¼Ó¿¡ GAATTC¶ó´Â ÆÐÅÏ¿¡¼ DNA¸¦ À߶óÁÖ´Â restriction enzymeÀ»¾²¸é
À̱׸²Ã³·³ ÇØ´çÀå¼Ò¿¡¼ DNA°¡ ½ÏµÏÀ߶óÁö°ÔµÇÁÒ
»ç¶÷¸¶´Ù DNA´Â ´Ù¸¥µ¥ DNA°¡ ¸¸¾à 1000°³Àε¥ »ç¶÷1Àº 300¹ø°¿¡ ÇØ´çÆÐÅÏÀÌÀÖ°í
»ç¶÷2´Â 500¹ø°¿¡ ÇØ´çÆÐÅÏÀ»°¡Áö°íÀÖ´Ù¸é °¢°¢ÀÇ DNA¿¡ restriction enzyme³ÖÀ¸¸é
»ç¶÷1ÀÇ DNA´Â ±æÀÌ°¡ 300°ú 700ÀÎ DNA Á¶°¢ µÎ°³·Î À߶óÁú°ÍÀÌ°í
»ç¶÷2ÀÇ DNA´Â ±æÀÌ°¡ 500°ú 500ÀÎ DNAÁ¶°¢ µÎ°³·Î À߶óÁö°ÙÁÒ
ÀÌ °úÁ¤Àº Á¤¸»°£´ÜÇÑÀÛ¾÷À¸·Î DNAµé¾îÀÖ´Â Å×½ºÆ®Æ©ºê¿¡ restriction enzyme ÆÄÀÌÆêÀ¸·Î ¾ÆÁÖÁ¶±Ý ÷°¡ÇØÁÖ¸é ³¡³ª´Â ÀÛ¾÷ÀÔ´Ï´Ù 10Ãʸ鳡³ª´Â ÀÛ¾÷¿ä
ÀÌ·¸°Ô Àß·ÁÁø DNA°¡ ´ëü ¾îµð¿¡ ¾²À̴°ųĶó°íÇϸé 5¹øÀ¸·Î°¡¾ßÇϴµ¥¿ä
±×·³
5¹ø Àü±â¿µµ¿ ´ëÇؼ ¼³¸íÀ»ÇÏÀÚ¸é...
DNA´Â ±âº»ÀûÀ¸·Î (-) charge¸¦ °¡Áý´Ï´Ù.
±×·¡¼ Àü±â°¡ È帣¸é DNA´Â +±ØÂÊÀ» ÇâÇØ À̵¿À»ÇØ¿ä.
±×·¡¼ ÀÌ·¯ÇÑ ÀåÄ¡¿¡´Ù°¡ À§¿¡¼ Àß·ÁÁø DNAÈ¥ÇÕ¹°À» ³Ö°í Àü±â¸¦ Èê·ÁÁÖ¸é
DNAµéÀº +±ØÂÊÀ¸·Î À̵¿À»ÇÏ°ÔµÇÁÒ
±×·±µ¥ ÀÌ‹š À̵¿Çϴ¼ӵµ´Â DNAÀÇ Å©±â°¡ Ŭ¼ö·Ï ´À¸®°Ô ÀÛÀ»¼ö·Ï ºü¸£°Ô À̵¿ÇÕ´Ï´Ù
À§¿¡¼ Àß·ÁÁø 300°³Â¥¸®¿Í 700°³Â¥¸®°¡ ¼¯¿©ÀÖ´Â DNA¸¦ ¿©±â³Ö°í µ¹¸®¸é
300°³Â¥¸®´Â ´õ¸Ö¸®À̵¿ÇÏ°í 700°³Â¥¸®´Â ´õÀû°ÔÀ̵¿À»Çؼ
¼·Î ºÐ¸®°¡µÇ´Ï±î ±×°Éº¸°í ¾Æ ÀÌ»ç¶÷Àº DNA°¡ Àß·ÁÁö´Â ÆÐÅÏÀÌ ¾îµð¾îµð¿¡ÀÖ±¸³ªÇÏ´Â°É ¾Ë¼öÀÕ°í
±×°ÉÅëÇØ À¯ÀüÀÚ ºñ±³°¡ °¡´ÉÇÕ´Ï´Ù.
Àü±â¿µµ¿À» ½ÇÁ¦·Î ÁøÇàÇϸé ÀÌ·±½ÄÀ¸·Î bandÀÇ ÇüÅ·ΠDNA°¡³ªÅ¸³ª°í ¾ó¸¶³ª À̵¿Çß´À³Ä¸¦ ¾Ë¼öÀÖÁö¿ä.
ÀÌ ¹æ¹ýµéÀ» ÀÌ¿ëÇؼ ÀÌ ³í¹®¿¡¼ ½ÇÇàÇÑ ½ÇÇèÀº
HIE ¶ó´Â Áúº´À» °¡Áø»ç¶÷µéÀÇ Ç÷¾×À» äÃëÇÏ°í (¾Æ¸¶ ÇöÁ÷ ÀÇ»çµéÀÌÇß°ÚÁÒ ÀÌ ´Ü°è´Â)
Ç÷¾×¿¡¼ DNAÃßÃâÇÏ°í
ÈÄ¿¡ Ãß°¡ºÐ¼®À»À§Çؼ DNA¸¦ PCR·Î ÁõÆø½ÃÅ°°í
ÁõÆøµÈ DNA À¯ÀüÀÚ¸¦ ºÐ¼®Çؼ
298¹ø° ¾Æ¹Ì³ë»êÀÌ ¹«¾ùÀÎÁö¸¦ µ¥ÀÌÅ͸¦ ¾ò¾ú°í
±× µ¥ÀÌÅ͸¦ Åä´ë·Î ȯÀÚ¸¦ ºÐ·ùÇß½À´Ï´Ù.
¸¶Áö¸·À¸·Î Åë°è¸¦ ±â¹ÝÀ¸·Î
298¹ø° ¾Æ¹Ì³ë»êÀÌ ÀÌ·±»ç¶÷µéÀº HIE ¶ó´Â Áúº´¿¡ ´ëÇؼ ÀÌ·¯ÀÌ·±µ¥
298¹ø° ¾Æ¹Ì³ë»êÀÌ Àú·±»ç¶÷µéÀº HIE¶ó´Â Áúº´¿¡´ëÇØ Àú·¯Àú·¸´Ù~
ÀÌ·± °á·ÐÀ» ³»¸°°Ì´Ï´Ù.
(Åë°èÅøÀº SPSS½è´Âµ¥ À̰͵µ Á¦ÀÏ ½¬¿îÅë°èÅøÁßÇϳªÀÔ´Ï´Ù)
HIE¶ó´Â Áúº´¿¡ ´ëÇÑ Áö½ÄÀÌ Â÷ÁöÇÏ´Â ºñÁßÀÚüµµ ³·°í ´ëºÎºÐÀº ºÐÀÚ»ý¹°ÇÐÀÇ Æ²¿¡¼ ÀÌ·ç¾îÁø ½ÇÇèÀΰÅÁÒ
±×¸®°í ±× ºÐÀÚ»ý¹°ÇÐÀÇ Æ²¿¡¼ ÀÌ·ç¾îÁø ½ÇÇèµéÀº
Á¦°¡ ¿©±â¼ ÀÌ·¸°Ô °£´ÜÇÏ°Ô ¼³¸íÀ» ÇÒ¼öÀÖÀ»Á¤µµ·Î ¸Å¿ì °£´ÜÇÏ°í ±âÃÊÀûÀÌ°í ¼öÁØÀ̳ôÁö¾ÊÀºÁ¤µµÀÇ ³í¹®ÀÔ´Ï´Ù.
¾Æ¸¶ Àü°øÀÚ¶ó¸é Ç÷¾×äÃë°¡ ³¡³½ÃÁ¡ºÎÅÍ ½ÇÇèÀ» ¸ðµÎ³¡³»´Âµ¥ ÀÌƲÀ̸é ÃæºÐÇÒ°Å°í ±×°Å °á°úÁ¤¸®Çϴµ¥¿¡´Â ÇÏ·çÀâ°í 3ÀÏ... contamination°°Àº°Å¶§¹®¿¡
ÀϺκР´Ù½ÃÇÑ´Ù°íÃĵµ ³Ë³ËÇϱâ 4-5ÀÏÀÌ¸é ³¡³¾¼öÀÖ½À´Ï´Ù.
³í¹®¿¡ ÇÊ¿äÇÑ Áö½ÄÀº À¯ÀüÇп¡¼ polymorphism¿¡ ´ëÇѺκР±×¸®°í pcr°ú Àü±â¿µµ¿ ÀÇ ¿ø¸® ±×¸®°í Çϴ¹ý Á¤µµ°¡ °íÀÛÀÔ´Ï´Ù
HIE¶ó´Â Áúº´¿¡ ´ëÇÑÁö½Ä º´¸®ÇÐ Áö½ÄÀº °ÅÀÇ ÇÊ¿ä°¡¾ø°í¿ä
ÇкΠ2ÇгâÁ¤µµ¸é »ý¹°ÇÐÀü°øÀÚ´Â À§¿¡ ³ª¿ÇѰ͵éÀ» ´ç¿¬ÇÏ°Ô ¸ðµÎ°¡ ´Ù ¾Ë°íÀִµ¥
±×°É °í·ÁÇϸé ÇкÎ1Çгâ»ýÀ̳ª Á¶±Ý ¶È¶ÈÇÑ °íµîÇлýÀÌ ±³¼öÁöµµÇÏ¿¡ ÇØ´ç½ÇÇèÀ»ÁøÇàÇÏ°í ³í¹®À» ÀÛ¼º(¿µ¾î°¡µÈ´Ù´Â ÀüÁ¦ÇÏ¿¡)Çϴ°ŴÂ
Å©°Ô ¾î·Á¿î ÀÏÀº ¾Æ´Ï¶ó°í »ý°¢ÇÕ´Ï´Ù. 2ÁÖ¶ó´Â ±â°£Àº ÃæºÐÇѽð£À¸·Îº¸ÀÌ°í¿ä
±×¿Í´Â º°µµ·Î »ý°¢ÇؾßÇÏ´ÂÁ¡Àº
°ú¿¬ Á¶±¹±³¼öµþÀÌ Á¦1 ÀúÀÚ°¡ µÇ±â¿¡ ÃæºÐÇÑ ±â¿©¸¦ ÇÏ¿´´Â°¡? Àΰǵ¥
ÀÌ°Å´Â »ç½Ç ±³¼ö°¡ ¾ó¸¶³ªÁö¿øÀ» ÇØÁÖ¾ú´ÂÁö¸¦ ¸ô¶ó¼ ÆÇ´ÜÇϱâÈûµçµ¥ ÀϹÝÀûÀ¸·Î¶ó¸é Á¦1ÀúÀÚ´Â Á¶±¹±³¼öµþº¸´Ù´Â Àü¹ÝÀûÀÎ ÀÏÀ» ÁöµµÇØÁØ ±³¼ö ȤÀº ¹Ú»ç°úÁ¤»ýµîÀÌ °¡Á®°¡´Â°Ô ¸Â´Â°Çµ¥....
À§¿¡¼ ¸»ÇßµíÀÌ ÀÌ ³í¹®Àº ¼öÁØÀÌ ¸Å¿ì ³·¾Æ¿ä SCIE´Ï ¼¼°èÀû ÇмúÁö´Ï ¹¹´Ï ¾ê±âÇÏÁö¸¸ ÁøÂ¥ ÀÌ°Å´Â ÀÌ°Ô Åë°úµÆ´Ù°í? ½ÍÀ»Á¤µµ·Î ¼öÁØÀ̳·Àº ³í¹®ÀÌ¿¡¿ä ´Ü¼øÀÛ¾÷ ¸î°³ÇÏ°í ±×³É ºÐ·ùÇÏ°í °á°úº¸°íÇÑ°Ô³¡ÀÎ ±×·±°Å¶ó¼...
ÇÊ¿äÇÑ ¹è°æÁö½Ä°ú ½ÇÇè¹æ¹ýµµ ±âÃÊÀûÀΰŶó¼¿ä... °á·Ðµµ ±×´Ú À¯¿ëÇÑ °á·Ð(ÀÌ ½ÇÇèÀÚü°¡ ¾îµð¿¡¾µ¸ð°¡Àִ½ÇÇèÀ̾ƴ϶ó´Â°Å..)Àº ¾Æ´Ï°í..
±×·¡¼ ±³¼ö°¡ ±³½ÅÀúÀÚ¶û 1ÀúÀÚ ´Ù°¡Á®°¡±âµµ ¹¹ÇÑ ³í¹®À̶ó°íÇϱ⿡µµ ¹Î¸ÁÇѼöÁØÀÇ ÆäÀÌÆÛ´Ùº¸´Ï...
1ÀúÀÚ ±×³ÉÁذžƴѰ¡ÇÏ´Â »ý°¢µµ µé°í
ȤÀº ¾ÖÃÊ¿¡ ÀÌ ³í¹®ÀÇ ³·Àº ¼öÁØÀ» °í·ÁÇϸé...¾ÖÃÊ¿¡ °í±³»ýµé ½ºÆå¿ë½×±â¿ëÀ¸·Î ±âȹµÈ ³í¹®ÀϼöµµÀÖ´Ù´Â »ý°¢Àº ¾î´ÀÁ¤µµµì´Ï´Ù.
ÇÏÁö¸¸ ±×ºÎºÐÀº Á¶±¹±³¼ö°¡ ¾Ð·ÂÀ»Çà»çÇÏ¿©¼ 1ÀúÀÚ¸¦ ¾ò¾î³»°Å³ª ³í¹®À» ±âȹÇϵµ·ÏÇѰԾƴ϶ó¸é ÇØ´ç±³¼öÀÇ ¿¬±¸À±¸® À§¹ÝÀÌ ¹®Á¦µÇ´Â°ÅÁö...Á¶±¹±³¼öÀÇ ¹®Á¦´Â ¾Æ´Ï¶ó°íº¸³×¿ä.
µÎÁÙ¿ä¾à
1. Á¶±¹±³¼öµþÀ̾´ ³í¹®Àº ¼öÁØÀ̳ôÀº°Íµµ¾Æ´Ï°í °íµîÇлýµµ ±³¼öÁöµµÇÏ¿¡ ÃæºÐÈ÷ ¼ÒÈÇÒ¼öÀִ³»¿ëÀ̶ó°íº¸ÀÓ
2. Á¦1ÀúÀÚ°¡ ¾î¶»°ÔµÉ¼öÀÖ¾ú´ÂÁö ±× ¹è°æÀº »ý°¢ÇغÁ¾ßÇÑ´Ù°íº½